產(chǎn)品描述

螢火蟲螢光素酶是一種分子量約為61 kD 的蛋白，在ATP、鎂離子和氧氣存在的條件下，可以催化Luciferin 氧化成Oxyluciferin，在Luciferin 氧化的過程中，并伴隨生物發(fā)光(Bioluminescence)。海腎螢光素酶是一種分子量約為36 kD的蛋白，在氧氣存在的條件下，可以催化Coelenterazine 氧化成Coelenteramide，在Coelenterazine 氧化的過程中也伴隨生物發(fā)光。生物發(fā)光是化學(xué)發(fā)光的一種形式，通過化學(xué)反應(yīng)釋放光能，可以通過化學(xué)發(fā)光儀(Luminometer)或液閃測(cè)定儀進(jìn)行測(cè)定。

在 DLR 檢測(cè)中，螢火蟲（Firefly）螢光素酶和海腎（Renilla）螢光素酶的活性可在單個(gè)樣品中依次檢測(cè)。先是先以螢光素(Luciferin)為底物來(lái)檢測(cè)螢火蟲螢光素酶(Firefly Luciferase)，后以腸腔素(Coelenterazine)為底物來(lái)檢測(cè)海腎螢光素酶(Renilla Luciferase)，并在后續(xù)加入海腎螢光素酶底物時(shí)，同時(shí)加入抑制螢火蟲螢光素酶催化Luciferin發(fā)光的物質(zhì)，使后續(xù)檢測(cè)僅僅檢測(cè)到海腎螢光素酶的活性，實(shí)現(xiàn)雙螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)。通過螢光素酶和其底物這一生物發(fā)光體系，可以非常靈敏、高效地檢測(cè)基因的表達(dá)。通常把感興趣基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控元件或5' 啟動(dòng)子區(qū)克隆在Luciferase 的上游，或把3'-UTR 區(qū)克隆在Luciferase 的下游等，構(gòu)建成報(bào)告基因(Reporter Gene)質(zhì)粒，然后轉(zhuǎn)染細(xì)胞，用適當(dāng)藥物等處理細(xì)胞后裂解細(xì)胞，測(cè)定螢光素酶活性。通過螢光素酶活性的高低來(lái)判斷藥物處理等對(duì)目的基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用。 Renilla Luciferase 相對(duì)更多地被用作轉(zhuǎn)染效率的內(nèi)參，以消除細(xì)胞數(shù)量和轉(zhuǎn)染效率的差異。

李記生物的Firefly & Renilla雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒，具有檢測(cè)迅速、靈敏度高、檢測(cè)范圍廣，無(wú)細(xì)胞內(nèi)源活性干擾等特點(diǎn)。

訂購(gòu)信息

產(chǎn)品組分

運(yùn)輸與保存

藍(lán)冰運(yùn)輸。-20℃保存，有效期12個(gè)月。

【注】：組分C建議預(yù)先使用組分B配制為2 mg/mL儲(chǔ)液，組分B、組分D及配制為儲(chǔ)液的組分C，根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求進(jìn)行小批量分裝。所有檢測(cè)工作液建議現(xiàn)配現(xiàn)用，避免反復(fù)凍融。

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